Микробиологическое исследование ран

Забор материала из открытых инфицированных ран

Забор материала при открытых повреждениях требует строгой последовательности действий, чтобы избежать попадания в образец нормальной микрофлоры кожи. В первую очередь проводится подготовка операционного поля: кожу строго вокруг раны обрабатывают антисептиком (используется 70% этиловый спирт) и обязательно дожидаются полного высыхания дезинфектанта. Затем приступают к механической очистке самой раневой поверхности.

С помощью стерильной салфетки необходимо удалить весь поверхностный детрит, скопления гноя и некротические массы. Достоверный материал для микробиологического исследования можно получить только с жизнеспособных («живых») тканей.

Для непосредственного забора используют стерильный тампон. Вращательными круговыми движениями тампон проводят от центра поражения к его периферии. Оптимальная длительность контакта со дном раны составляет от 5 до 10 секунд. Критически важно при извлечении инструмента ни в коем случае не касаться окружающих интактных тканей, слизистых оболочек или краев кожи. Сразу после взятия мазка тампон погружают в пробирку с транспортной средой для фиксации микроорганизмов.

Особенности работы с глубокими ранами и абсцессами

Алгоритм взятия образцов из глубоких ран и абсцессов существенно отличается. Подготовительный этап включает аккуратное удаление поверхностного экссудата (используют салфетку, смоченную физиологическим раствором или 70% спиртом), с последующей дезинфекцией и высушиванием поверхности.

Приоритетным методом забора в данном случае является аспирация шприцем содержимого из самой глубины раневого канала. Если на дне дефекта присутствуют везикулы, необходимо аспирировать их жидкое содержимое вместе с клетками основания. В ситуациях, когда свободная жидкость отсутствует, в полость раны вводят стерильный физиологический раствор, после чего проводят повторную аспирацию получившегося смыва.

Полученный жидкий аспират переносят в пустую стерильную пробирку. В качестве альтернативы допускается обильно пропитать стерильный тампон собранным экссудатом и затем поместить его в транспортную среду. При диагностике сформированных абсцессов берут дополнительные пробы:

• Биоптат: кусочек ткани из стенки гнойника (с помощью тампона его проталкивают вглубь транспортной среды).
• Микроскопия: отдельным тампоном содержимое наносят на предметное стекло для прямого изучения.

Правила транспортировки и первичный посев

Успех бактериологической диагностики во многом зависит от соблюдения логистики. Оптимальный срок доставки собранного материала в микробиологическую лабораторию составляет не более 1 часа с момента взятия. Если немедленная транспортировка невозможна, образцы разрешается хранить в холодильнике, но максимальное время задержки не должно превышать 2 часов.

В лаборатории осуществляется первичный посев (инокуляция). Материал с тампона распределяют на стандартный набор питательных сред:

1. 5% кровяной агар (для большинства патогенов);
2. Тиогликолевую среду (специально для культивирования анаэробов);
3. Сахарный бульон.

Обязательному посеву подлежат не только мазки или жидкий аспират, но и твердые кусочки тканей, доставленные из операционной.

Методика посева тканевого материала

Плотные образцы (тканевые биоптаты, мышечные фрагменты, участки кожи или костные секвестры), полученные в ходе хирургической обработки, требуют особого подхода. Первично такие ткани помещают в жидкие среды: тиогликолевую (поддерживающую рост как анаэробов, так и аэробов) и сахарный бульон, который служит средой обогащения.

Для получения изолированных колоний микроорганизмов даже из сложных микробных ассоциаций на плотных средах применяют технику «тампон-петля». Она состоит из двух этапов:

• Этап 1 (Тампон): Сначала тампоном с материалом проводят сплошную «дорожку» через весь диаметр чашки Петри. Затем инструмент переворачивают и другой (чистой) стороной делают вторую «дорожку», строго параллельную первой, но в обратном направлении.
• Этап 2 (Петля): С помощью бактериологической петли нанесенный материал рассеивают частыми штрихами, которые располагают строго перпендикулярно ранее сделанным «дорожкам».

Чашки Петри с посевами инкубируют при стандартном режиме: температура 37 °C в течение 18–24 часов. Если спустя сутки визуальный рост микроорганизмов отсутствует, посевы не утилизируют. Их оставляют в термостате на срок до 5 суток, чтобы не пропустить рост медленнорастущих бактерий.

Вопросы с занятий и экзамена

Что ещё разобрать по теме

• Обоснование выбора сред для первичного посева (5% кровяной агар, тиогликолевая среда, сахарный бульон).
• Особенности забора материала при наличии везикул на дне дефекта.
• Детальная техника посева «тампон-петля» для выделения изолированных колоний.
• Алгоритм подготовки кожи вокруг операционного поля перед взятием мазка.
• Принципы микроскопии отдельного мазка при диагностике сформированных абсцессов.

Другие темы раздела «Клиническая микробиология»

Материал подготовлен преподавателями Школы Сеченова по учебной программе медицинских вузов. Носит образовательный характер.