Принципы классификации
Для того чтобы изучать ткани под микроскопом, их необходимо контрастировать. Все применяемые в гистологии красящие вещества делятся ровно на четыре группы. Главным критерием такого разделения выступает химическая природа самого красителя, а также его сродство к определенным структурам внутри клетки или во внеклеточном матриксе. Понимание этой классификации — ключ к расшифровке любого гистологического препарата.
Кислые красители и оксифилия
По своей химической природе данные вещества представляют собой кислоты, а также их кислые соли. Ключевое свойство тканевых структур, благодаря которому они связываются с такими веществами, называется оксифилией.
Типичными представителями этой группы являются ярко-розовый эозин и кислый фуксин. Их главными «мишенями» выступают оксифильные структуры, богатые основными химическими группами:
- Белки цитоплазмы большинства клеток (включая гемоглобин, содержащийся в эритроцитах).
- Неклеточные структуры, в первую очередь — коллагеновые волокна межклеточного вещества.
Основные красители и базофилия
Эта группа представлена основными солями. Способность тканей связываться с ними носит название базофилии. Среди наиболее известных представителей можно выделить кармин, азур II и гематоксилин (причем активным красящим веществом в последнем случае выступает продукт его окисления — гематеин).
Основные красители избирательно связываются со структурами, которые богаты органическими кислотами. К таким базофильным мишеням относятся:
- Ядра клеток и рибосомы. Окрашивание происходит за счет высокого содержания в них нуклеиновых кислот (ДНК и РНК).
- Аморфный компонент межклеточного вещества. Здесь реакция обусловлена присутствием гиалуроновой кислоты и других подобных соединений.
Нейтральные и индифферентные красители
Нейтральные красители представляют собой сложную смесь из основных и кислых красящих веществ. Принцип их действия заключается в одновременном окрашивании различных компонентов ткани в свои специфические цвета. Классическими мишенями для них (нейтрофильными структурами) выступают специфическая зернистость нейтрофильных лейкоцитов и цитоплазма полихроматофильных эритробластов.
Индифферентные красители кардинально отличаются от остальных. По своей природе это гидрофобные и липофильные вещества, которые абсолютно нерастворимы в воде. Самые известные представители — Судан III и Судан IV.
Их механизм окраски базируется не на химической реакции с компонентами ткани, а на исключительно физическом растворении самого красителя в жирах и липидах. В результате такого процесса липидные капли приобретают насыщенный ярко-оранжевый цвет, что позволяет легко идентифицировать их на препарате.
Коротко: ответы на вопросы по теме
Чем отличаются метахроматические красители от ортохроматических?
Метахроматические красители отличаются способностью изменять свой исходный цвет при контакте с хромотропными веществами, в то время как информация об ортохроматических красителях в данных материалах отсутствует. Явление метахромазии обусловлено высокой концентрацией гликозамингликанов в ткани. К метахроматическим красителям относятся:
- Толуидиновый синий — окрашивает вещество не в синий, а в другой (фиолетово-красный) цвет.
- Метиленовый синий — также вызывает явление метахромазии.
Какие гистологические красители применяются для выявления гликогена?
Для выявления гликогена применяются фуксин Шиффа (в рамках ШИК-реакции) и кармин Беста. В гистологической практике используются следующие методы:
- Фуксин Шиффа — применяется при ШИК-реакции (PAS-реакции) после окисления препарата йодной кислотой. Глыбки гликогена окрашиваются в фиолетовый, темно-красный или темно-малиновый цвет.
- Кармин Беста — используется для специфической дифференцировки гликогена и дает красное окрашивание.
Для подтверждения наличия гликогена применяют ферментативный контроль (обработку срезов амилазой).
Какими красителями выявляют эластические волокна?
Эластические волокна выявляют с помощью окраски орсеином или комбинацией пикрофуксина с гематоксилином, так как при стандартных методах они не контрастны. Методы окраски:
- Орсеин — избирательный метод, при котором эластические волокна и мембраны приобретают вишневый (или вишнево-красный) цвет на слабо-розовом фоне остальных тканей.
- Пикрофуксин с гематоксилином — дифференциальный метод, окрашивающий эластические волокна в желтый цвет под действием пикриновой кислоты, коллагеновые волокна — в красный, а ядра клеток — в фиолетовый.
Запомнить базофилию просто: БАЗовые (основные) красители связываются с кислотами (ДНК, РНК в ядрах). Оксифилия — наоборот, КИСЛЫЕ красители красят белки и цитоплазму.
Вопросы с занятий и экзамена
В чем разница между оксифилией и базофилией?
Оксифилия — это способность структур окрашиваться кислыми красителями (так красятся белки цитоплазмы и коллаген). Базофилия — сродство к основным красителям, характерное для структур, богатых кислотами (ядра, рибосомы, аморфное вещество).
Каков механизм действия индифферентных красителей?
В отличие от других групп, они не вступают в химические реакции с тканью. Индифферентные красители (например, Судан III) физически растворяются в липидах и жирах, окрашивая их в ярко-оранжевый цвет.
Что окрашивают нейтральные красители?
Они состоят из смеси кислых и основных веществ, окрашивая нейтрофильные структуры: специфическую зернистость нейтрофильных лейкоцитов и цитоплазму полихроматофильных эритробластов.
Что ещё разобрать по теме
- Процесс окисления гематоксилина в гематеин
- Окрашивание гемоглобина эритроцитов эозином
- Выявление коллагеновых волокон кислым фуксином
- Химическая природа гиалуроновой кислоты и ее базофилия
- Физико-химические свойства Судана III и Судана IV
Разберите тему целиком в курсе «Гистология»
Здесь — выжимка. В курсе — всё, что спрашивают на занятии и экзамене.
- Полная методичка по теме «Гистологические красители» и ещё 3 438 страниц предмета
- Задания и тесты после каждой темы — как на коллоквиуме
- AI-тьютор ответит на вопрос по теме в любое время
- 137 видеоуроков по предмету
Другие темы раздела «Техника гистологического исследования»
Бесплатные видеоуроки: гистологияКороткие уроки с конспектами — без регистрации.
Материал подготовлен преподавателями Школы Сеченова по учебной программе медицинских вузов. Носит образовательный характер.