От линейной цепи к трехмерной структуре
После завершения синтеза полипептидной цепи процесс формирования молекулы еще не закончен. Линейная последовательность не способна выполнять биологические задачи — для этого требуется формирование полноценной третичной структуры.
Процесс сворачивания полипептидной цепи в правильную, функционально активную трехмерную структуру называется фолдингом. Главным фактором, который выступает абсолютной детерминантой этого процесса, является первичная структура белка. Именно уникальная последовательность аминокислот, заложенная генетически, диктует, какую итоговую трехмерную конфигурацию примет макромолекула. Несмотря на то что белки обладают способностью к самосборке, в реальных условиях живой клетки этот процесс нуждается в строгом контроле и значительном ускорении.
Помощники фолдинга: ферменты
Для того чтобы процесс сворачивания шел быстро и без критических ошибок, клетка использует специальный арсенал вспомогательных молекул. В первую очередь к ним относятся ферменты фолдинга.
Ярким примером таких катализаторов служит фермент, отвечающий за обмен дисульфидных связей. В процессе сложного сворачивания длинной полипептидной цепи отдельные участки могут сближаться случайным образом. Из-за этого часто образуются «неправильные» дисульфидные (S-S) мостики, которые фиксируют молекулу в ошибочной, нерабочей конформации. Задача специализированного фермента заключается в следующем:
- Он находит и разрывает случайно образовавшиеся, ошибочные S-S связи.
- Помогает цепи перестроиться.
- Замыкает «правильные» дисульфидные связи, тем самым окончательно стабилизируя корректную третичную структуру.
Молекулярные шапероны (Chaperones)
Вторая, не менее важная группа ускорителей и контролеров фолдинга — это молекулярные шапероны. Их работа разделяется на два важнейших этапа в зависимости от стадии жизни белка.
- Ко-трансляционное действие. Шапероны начинают свою работу очень рано. Они связываются с растущей пептидной цепью непосредственно на рибосоме, еще до того, как синтез белка будет полностью завершен. Главная функция на этом этапе — препятствовать преждевременному или «неправильному» сворачиванию отдельных фрагментов цепи, пока вся молекула не будет синтезирована целиком.
- Пост-трансляционное действие. После завершения синтеза некоторые белки должны быть доставлены в специфические органеллы. Например, белки митохондрий транспортируются из цитоплазмы внутрь органеллы. Чтобы пройти через мембраны, белок должен находиться в развернутом виде. Шапероны надежно удерживают молекулу в такой вытянутой форме на протяжении всего пути. Только после того, как белок оказывается внутри митохондрии, шапероны отсоединяются, позволяя ему наконец принять свою нативную (рабочую) форму.
Защитная роль при стрессе (Тепловой шок)
Жизнь клетки не всегда протекает в идеальных условиях. При экстремальных воздействиях, таких как тепловой стресс (повышение температуры), возникает серьезная проблема: готовые белки денатурируют, то есть теряют свою нативную конформацию и разворачиваются.
В ответ на эту угрозу клетка запускает мощную спасительную реакцию — резко усиливается синтез дополнительных шаперонов. Именно поэтому они получили свое альтернативное название — белки теплового шока (HSP).
Механизм защиты выглядит следующим образом:
- Шапероны экстренно связываются с измененными, денатурирующими белками.
- Они физически предотвращают их полное, необратимое разворачивание и слипание (агрегацию) друг с другом.
- После прекращения температурного стресса шапероны диссоциируют (отсоединяются), давая спасенному белку возможность самостоятельно восстановить свою исходную нативную структуру и продолжить работу.
Коротко: ответы на вопросы по теме
Какие основные семейства молекулярных шаперонов (например, Hsp70, шаперонины Hsp60) функционируют в клетке?
В источниках как молекулярные шапероны описаны белки теплового шока (HSP). У млекопитающих перечислены HSP20, HSP40, HSP60, HSP70 и HSP90.
В норме HSP выполняют шаперонные функции: поддерживают оптимальную конформацию синтезируемых белков после сборки субъединиц и процессинга. Также указаны основные представители HSP70 (молекулярная масса около 70 000) и HSP90 (около 90 000).
При клеточном или тепловом стрессе экспрессия/синтез HSP усиливается; шапероны связываются с изменёнными белками и предотвращают их необратимое разворачивание и агрегацию.
Как нарушение процесса фолдинга связано с развитием амилоидозов и прионных заболеваний?
Нарушение правильного сворачивания (фолдинга) собственного клеточного белка в источниках описано как основа конформационных болезней. В норме белки-шапероны обеспечивают правильную функциональную конформацию синтезированных белков; при патологии этот процесс нарушается, результатом могут быть нейродегенеративные заболевания и диспротеинозы.
Для прионов указано, что это частицы белковой природы и возбудители конформационных болезней. Нормальная клеточная форма прионного белка обозначается PrP^c, патологическая изменённая форма — PrP^sc; они отличаются конформацией (пространственной структурой). Примеры прионных заболеваний: болезнь Крейтцфельдта–Якоба, куру, фатальная семейная бессонница.
Также накопление неупакованных или неправильно упакованных белков связано с ЭПР-стрессом, реакцией на протеины с нарушенным фолдингом (Unfolded Protein Response), активацией каспаз и апоптозом; это характерно для нейродегенеративных заболеваний, включая болезни Альцгеймера, Гентингтона и Паркинсона. Прямая связь с амилоидозами в предоставленных источниках не описана.
С помощью каких механизмов клетка утилизирует белки, фолдинг которых прошел с необратимыми ошибками?
В источниках указаны следующие пути удаления белков с дефектным фолдингом:
- В цитоплазме сначала возможно исправление с помощью шаперонов; если оно не удаётся, белок убиквитинируется и направляется в протеасому.
- При необратимом повреждении включается убиквитиновый механизм: убиквитин присоединяется к повреждённому белку, после чего белок расщепляется до нетоксичных фрагментов нелизосомальными протеиназами.
- В ЭПР неправильно свёрнутые белки удаляются системой ERAD: белок распознаётся системой контроля качества, перемещается из ЭПР обратно в цитозоль, убиквитинируется и расщепляется 26S-протеасомой.
- При накоплении множества дефектных белков формируются агрегаты, которые удаляются через аутофагию; при макроаутофагии агрегаты окружаются фагофором, образуется аутофагосома, затем после слияния с лизосомой содержимое расщепляется гидролазами.
Чтобы запомнить две роли шаперонов, представьте их как строгих «телохранителей». В обычное время они сопровождают белок от рибосомы до митохондрии, не давая ему «свернуться» с пути. А при «пожаре» (тепловом шоке) они закрывают белок собой, не давая ему развалиться и погибнуть.
Вопросы с занятий и экзамена
Что определяет итоговую трехмерную форму белка?
Трехмерная конфигурация макромолекулы строго определяется ее первичной структурой — генетически заданной последовательностью аминокислот.
Как работают ферменты, контролирующие дисульфидные связи?
Эти ферменты находят и разрывают случайно образовавшиеся «неправильные» S-S связи в сворачивающейся цепи, после чего замыкают «правильные» мостики для окончательной стабилизации структуры.
Зачем нужны шапероны во время синтеза на рибосоме?
Они связываются с пептидной цепью ко-трансляционно, чтобы предотвратить преждевременное и неправильное сворачивание фрагментов до того, как синтез будет полностью завершен.
Какую функцию выполняют белки теплового шока (HSP)?
При стрессе белки денатурируют. HSP (шапероны) связываются с ними, предотвращая их необратимое разворачивание и агрегацию. Когда стресс проходит, шапероны отсоединяются, позволяя белку восстановить форму.
Что ещё разобрать по теме
- Особенности формирования третичной структуры белка
- Механизмы работы ферментов обмена дисульфидных связей
- Ко-трансляционный контроль на рибосоме
- Пост-трансляционный транспорт белков в митохондрии
- Патогенез агрегации белков при необратимой денатурации
Разберите тему целиком в курсе «Гистология»
Здесь — выжимка. В курсе — всё, что спрашивают на занятии и экзамене.
- Полная методичка по теме «Фолдинг белков» и ещё 3 438 страниц предмета
- Задания и тесты после каждой темы — как на коллоквиуме
- AI-тьютор ответит на вопрос по теме в любое время
- 137 видеоуроков по предмету
Другие темы раздела «Цитоплазма»
Бесплатные видеоуроки: гистологияКороткие уроки с конспектами — без регистрации.
Материал подготовлен преподавателями Школы Сеченова по учебной программе медицинских вузов. Носит образовательный характер.